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혈행개선

동물실험법

제목 Thrombosis 평가
구분 혈행개선 링크 혈소판 활성, 혈액응고
실험배경

동맥혈전은 혈소판과 콜라겐 등의 내피하조직(subendothelial tissue)의 반응으로 시작하여 혈액응고인자의 활성화에 의해 생긴 섬유소들에 의해 생성되므로 주로 응집된 혈소판으로 이루어져 있다. In vivo 모델에서 동맥 혈관에 FeCl3를 처리한 여과지를 부착하여 폐색(occlusion)시키면 혈전 생성을 유도할 수 있는데, 시험물질 처리 여부에 따라 혈전 생성 시간과 혈전의 크기 변화를 측정함으로써 혈전 생성 억제능력을 파악할 수 있다.
실험재료
필요장비 및 소모품

10ml 주사기, 겸자, ultrasonic flow probe

 
필요시약

medetomidine, midazolam, fentanyl

 
세포주

Mouse

 
실험방법

1. Medetomidine(0.5ug/g), midazolam(5ug/g), fentanyl(0.05ug/g)을 IP로 injection하여 쥐를 마취한다.

2. 마취한 쥐의 복강을 열고 복부대동맥을 노출시킨다.

3. Ultrasonic flow probe를 혈관에 위치시키고 위 쪽에 겸자로 압력을 강하게 한 번 주어서 혈전 생성을 유도한다.

4. 혈류를 관찰하면서 혈전이 완전히 생길 때까지의 시간을 측정한다(5분~30분 소요).
결과해석

혈전 생성에 걸리는 시간이 길수록 혈행 개선 효과 있다고 판단할 수 있다.
참고문헌 1. Judith MM, David S, David JL, Peter K, Sarah B, Ina T, Friedemann K, Barbara W, Guido S, Bernhard N, The novel oral Syk inhibitor, Bl1002494, protects mice from arterial thrombosis and thrombo-inflammatory brain infarction, Arterioscler Thromb Vasc Biol. 36(6):1247-53, 2016
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제목 Thrombosis 평가 링크 혈소판 활성, 혈액응고
실험재료
필요장비 및 소모품

10ml 주사기(BD falcon), 겸자, ultrasonic flow probe(Transonic Systems)

 
필요시약

medetomidine(Pfizer), midazolam(Roche Diagnostics), fentanyl(Janssen-Cilag)

 
실험방법

1. Medetomidine(0.5ug/g), midazolam(5ug/g), fentanyl(0.05ug/g)을 IP로 injection하여 쥐를 마취한다.

2. 마취한 쥐의 복강을 열고 복부대동맥을 노출시킨다.

3. Ultrasonic flow probe를 혈관에 위치시키고 위 쪽에 겸자로 압력을 강하게 한 번 주어서 혈전 생성을 유도한다.

4. 혈류를 관찰하면서 혈전이 완전히 생길 때까지의 시간을 측정한다(5분~30분 소요).
실험결과 예


출처: Judith MM et al., 2016 
결과해석

BI1002494 처리에 의해 혈전 생성에 걸리는 시간이 크게 증가하였으므로, BI1002494는 혈행 개선 기능성이 있다고 볼 수 있다.
참고문헌 1. Judith MM, David S, David JL, Peter K, Sarah B, Ina T, Friedemann K, Barbara W, Guido S, Bernhard N, The novel oral Syk inhibitor, Bl1002494, protects mice from arterial thrombosis and thrombo-inflammatory brain infarction, Arterioscler Thromb Vasc Biol. 36(6):1247-53, 2016
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