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인지능력개선

동물실험법

제목 수미로
구분 인지능력향상 링크 행동실험법
실험배경

Morris water maze(수미로)는 수조 안에 놓아 둔 플랫폼을 기억하고 빠른 시간 안에 도달하는 지를 측정하는 것으로, 실험동물의 공간학습능력을 측정하기 위한 실험방법이다.

실험재료
필요장비 및 소모품

원형 수조, 비디오 테이프, 촬영장비, 행동실험 분석 프로그램

 
필요시약

물감

 
세포주

mouse, rat 등

 
실험방법

1. 원형수조에 물을 붓고, 플랫폼을 설치한다. 

2. 플랫폼의 위치가 보이지 않도록 물감을 붓는다. 

3. 비디오카메라가 원형수조 위에서 중앙을 향하도록 설치한다.

4. 수미로를 사분면(북동, 북서, 남동, 남서)로 구분하고, 이중 하나를 출발위치로 사용한다. 

5. 실험동물을 주변 환경에 적응시킨 후, 수면 아래에 숨겨진 플랫폼을 180초 내에 찾도록 훈련시킨다(acquisition test). 플랫폼을 못 찾는 실험동물은 플랫폼으로 향하도록 유인한 다음, 30초간 머물게 하여 위치를 기억하도록 한다.

6. 마지막 날에 자유수영검사(retention test)를 시행한다. 이 때 플랫폼을 제거한 채로 60초간 수영을 하게하고, 실험동물의 행동은 비디오카메라로 녹화한다. 

7. 프로그램을 이용하여 분석한다.

결과해석

Escape latency, swimming speed, crossing number, distance 등의 관찰을 통해 인지능력개선 효능을 평가할 수 있다.

참고문헌 1. Um MY, Ahn JY, Kim S, Kim MK, Ha TY. Sesaminol glucosides protect beta-amyloid peptide-induced cognitive deficits in mice. Biol Pharm Bull. 32(9):1516-1520, 2009
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제목 수미로 링크 행동실험법
실험재료
필요장비 및 소모품

원형 수조 (직경 180 cm, 높이 50 cm),  비디오카메라, 행동실험 분석 프로그램 [S-MART video tracking system],  온도계 등

 
필요시약

흰색 물감

 
실험방법

1. 수미로 준비 

1) 직경 180 cm, 높이 50 cm의 원형수조에 플랫폼을 설치한 후, 플랫폼 보다 1.5 cm 정도 높게 물을 채운 후 온도를 22±1℃로 설정한다. 

Tips: 플랫폼 위치를 항상 고정시킨다.  

2) 물감(흰색 또는 검정색)을 풀어서, 플랫폼의 위치가 보이지 않도록 한다. 

3) 비디오카메라가 원형수조 위에서 중앙을 향하도록 설치한다.

4) 프로그램을 실행한다.

5) 수미로 및 플랫폼의 크기와 위치를 프로그램의 setting 옵션으로 맞춘다.

6) 카메라가 실험대상을 잘 쫓는지 확인하기 위하여, 추적기능을 실행하여 확인한다.

 

2. 수미로 실험과정 

1) 7일 동안 행동실험을 진행한다. 

Tips: 행동실험 기간은 실험목적에 따라 변경 가능하다. 

2) 실험동물을 주변 환경에 적응시킨다. 

3) 1-6일까지는 acquisition test을 실시한다.

Tips: 

- 4방위에서 실험을 실시한다. 

- 실험동물이 180초간 수면아래 숨겨진 플랫폼을 찾도록 연습시킨다. 

- 도착한 플랫폼에 30초간 머물게 하여 수면으로부터 탈출하였다는 사실을 인지시킨다. 

- 플랫폼을 찾지 못하는 경우에는 실험자가 실험동물을 플랫폼 쪽으로 유인한 다음, 30초간 머물게 하여 위치를 기억시킨다. 

4) 7일에는 retention test를 실시한다. 이 때 플랫폼을 제거한 채로 60초간 수영을 하게하고, 실험동물의 행동은 비디오카메라로 녹화한다.  

5) S-MART 분석 프로그램을 이용하여 촬영한 영상을 데이터로 정리한다.

실험결과 예


출처: Um MY et al., 2013

결과해석

Aβ투여군과 비교하여, 시험물질 보충군의 플랫폼 도달 시간이 감소되어 인지기능개선 효과를 확인할 수 있다. 

참고문헌 1. Um MY, Ahn JY, Kim S, Kim MK, Ha TY. Sesaminol glucosides protect beta-amyloid peptide-induced cognitive deficits in mice. Biol Pharm Bull. 32(9):1516-1520, 2009
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