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인지능력개선

동물실험법

제목 Choline acetyltransferase 활성 측정
구분 인지능력향상 링크 신경전달물질 및 시냅스 가소성
실험배경

Choline acetyltransferase(콜린아세틸전이효소, ChAT)는 아세틸콜린(acetylcholine) 합성에 관여하는 효소로, 활성증가는 뇌조직의 아세틸콜린 함량을 증가시킬 것으로 판단된다. 따라서, 기능성 소재의 효능을 확인하기 위한 바이오마커로 활용할 수 있다. 

실험재료
필요장비 및 소모품

ELISA, 96 well plates, pipette, pipette tip, multipipette

 
필요시약

Choline acetyltransferase assay kit

 
세포주

mouse, rat 등

 
실험방법

1. 실험에 필요한 시약과 용매를 준비한다. 

2. 96 well plate에 표준용액 및 균질액을 넣고, 1시간 반응시킨다. 

3. Detection reagent A를 넣고 1시간 동안 반응시킨다.

4. Washing한다.

5. Detection reagent B를 넣고 1시간 동안 반응시킨다.

6. Washing한다.

7. Substrate solution를 넣고 15-25분 반응시킨다.

8. Stop solution을 넣는다.

4. 450nm에서 흡광도를 측정한다.

결과해석

시험물질에 의한 Choline acetyltransferase 활성 증가는 아세틸콜린 합성에  영향을 미칠 수 있을 것으로 판단된다. 

참고문헌 1. Yu TX, Zhang P, Guan Y, Wang M, Zhen MQ. Protective effects of luteolin against cognitive impairment induced by infusion of Aβ peptide in rats. Int J Clin Exp Pathol. 8(6):6740-6747, 2015
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제목 Choline transferase 활성 측정 링크 신경전달물질 및 시냅스 가소성
실험재료
필요장비 및 소모품

ELISA(TECAN), 96 well plates(Falcon), pipette(eppendorf), pipette tip(QSP), multipipette(eppendorf)

 
필요시약

Choline acetyltransferase assay kit(USCN)

 
실험방법

1. 실험에 필요한 시약과 용매를 준비한다. 

2. 96 well plate에 표준용액 및 균질액 100 μl 넣고, 37℃에서 1시간 반응시킨다. 

3. Detection reagent A를 넣고, 37℃에서 1시간 동안 반응시킨다.

4. Washing한다(3회 반복).

5. Detection reagent B를 넣고, 37℃에서 1시간 동안 반응시킨다.

6. Washing한다(5회 반복).

7. Substrate solution 90μl 넣고, 37℃에서 15-25분 반응시킨다.

8. Stop solution을 넣는다.

4. 450nm에서 흡광도를 측정한다.

실험결과 예


출처: Yu TX et al., 2015

결과해석

대조군과 비교하여, 시험물질 보충군에서 ChAT 활성 증가가 아세틸콜린 합성에 영향을 미칠 것으로 판단된다.

참고문헌 1. Yu TX, Zhang P, Guan Y, Wang M, Zhen MQ. Protective effects of luteolin against cognitive impairment induced by infusion of Aβ peptide in rats. Int J Clin Exp Pathol. 8(6):6740-6747, 2015
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