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기능/지표 성분기능/지표 성분 입니다

기능/지표 성분 분석법

기능/지표 성분 분석법 상세페이지
구분 페놀류 성분명 대두이소플라본(제2법)
개요 본 시험법은 메탄올을 이용하여 시료 중 이소플라본을 추출하여 액체크로마토그래프/자외부흡광광도검출기를 이용하여 분석하는 방법으로 최대 흡수파장인 260 nm에서 정량분석 한다.
장비 및 재료 [ 실험실 장비 및 소모품 ]
삼각플라스크(250 mL)
항온수조
원심분리기
용매용 일회용 실린지
여과용 멤브레인 필터
액체크로마토그래프용 유리병
부피플라스크(50 mL)
    
[ 분석장비 ]
고속액체크로마토그래프
자외부흡광광도검출기
칼럼오븐
옥타데실실릴화한한 칼럼(안지름 4.6mm, 길이 250mm, 충진재 octadecyl silica) 또는 이와 동등한 것
   
[ 분석장비의 준비 ]
이동상을 이용하여 용매를 분당 1.0 mL로 충분한 시간동안 흘려 안정화 시킨다.
표준물질 및
일반시약
[ 표준물질 ]
1. 이소플라본류
1.1. 다이드진(Daidzin)
- 분자식 : C21H20O9, 분자량 : 416.38, CAS No. : 552-66-9
 
    
1.2. 글리시틴(Glycitin)
- 분자식 : C22H22O10, 분자량 : 446.41, CAS No. : 40246-10-4
   
    
1.3. 제니스틴(Genistin)
- 분자식 : C21H20O10, 분자량 : 432.38, CAS No. : 529-59-9
 
 
    
1.4. 다이드제인(Daidzein)
- 분자식 : C15H10O4, 분자량 : 254.23, CAS No. : 486-66-8
   
   
         
1.5. 제니스테인(Genistein)
- 분자식 : C15H10O5, 분자량 : 270.24, CAS No. : 446-72-0
   
    
1.6. 글리시테인(Glycitein)
- 분자식 : C16H12O5, 분자량 : 284.26, CAS No. : 40957-83-3
  
       
[ 일반시약 ]
1. 메탄올(Methanol)
2. 초산(Acetic acid)
3. 증류수(Distilled water)
4. 수산화나트륨(Sodium hydroxide)
방법 [ 표준용액의 조제 ]
1. 각 이소플라본(Daidzin, Genistin, Glycitin, Daidzein, Genistein, Glycitein) 표준물질 50mg을 정밀히 측정한다.
2. 정밀히 측정한 표준물질을 50mL 부피플라스크에 넣는다.
3. 배당체(Daidzin, Genistin, Glycitin) 표준품은 메탄올을 가하여 완전히 녹인 후 이를 표준원액으로 한다.
4. 비배당체(Daidzein, Genistein, Glycitein) 표준품은 Dimethyl sulfoxide를 가하여 완전히 녹인 후 이를 표준원액으로 한다.
5. 위의 용액을 메탄올로 적절히 희석하여 표준용액으로 한다.
       
[ 시험용액의 조제 ]
1. 시료 1~10g을 정밀히 취한다.
2. 위의 시료를 250mL 삼각플라스크에 넣는다.
3. 여기에 80% 메탄올 40mL를 넣은 후 호일을 씌운다.
4. 65℃ 항온수조에서 2시간 추출한다.
5. 냉각시킨 후 2M 수산화나트륨용액 3mL를 넣는다.
6. 이를 상온에서 10분간 회전 교반한 후 초산 1mL를 넣는다.
7. 80% 메탄올을 사용하여 50mL로 하여 하고 혼합한다.
8. 여액 5mL에 증류수 4mL를 넣고 메탄올을 사용하여 10mL로 한다.
9. 원심분리(5,000rpm, 5분)한 상등액을 0.45㎛ 멤브레인 필터로 여과한다
결과분석 및
계산
[ 표준용액의 조제 ]
1. 각 이소플라본(Daidzin, Genistin, Glycitin, Daidzein, Genistein, Glycitein) 표준물질 50mg을 정밀히 측정한다.
2. 정밀히 측정한 표준물질을 50mL 부피플라스크에 넣는다.
3. 배당체(Daidzin, Genistin, Glycitin) 표준품은 메탄올을 가하여 완전히 녹인 후 이를 표준원액으로 한다.
4. 비배당체(Daidzein, Genistein, Glycitein) 표준품은 Dimethyl sulfoxide를 가하여 완전히 녹인 후 이를 표준원액으로 한다.
5. 위의 용액을 메탄올로 적절히 희석하여 표준용액으로 한다.
       
[ 시험용액의 조제 ]
1. 시료 1~10g을 정밀히 취한다.
2. 위의 시료를 250mL 삼각플라스크에 넣는다.
3. 여기에 80% 메탄올 40mL를 넣은 후 호일을 씌운다.
4. 65℃ 항온수조에서 2시간 추출한다.
5. 냉각시킨 후 2M 수산화나트륨용액 3mL를 넣는다.
6. 이를 상온에서 10분간 회전 교반한 후 초산 1mL를 넣는다.
7. 80% 메탄올을 사용하여 50mL로 하여 하고 혼합한다.
8. 여액 5mL에 증류수 4mL를 넣고 메탄올을 사용하여 10mL로 한다.
9. 원심분리(5,000rpm, 5분)한 상등액을 0.45㎛ 멤브레인 필터로 여과한다
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