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기능/지표 성분기능/지표 성분 입니다

기능/지표 성분 분석법

기능/지표 성분 분석법 상세페이지
구분 당 및 탄수화물류 성분명 (+)-HCA락톤
개요 본 시험법은 시료 중 존재하는 (+)-HCA락톤을 이동상인 10mM 황산용액으로 용해시키고 초음파 추출하여 옥타데실실릴화한 칼럼을 통하여 분리하는 방법으로 자외부흡광광도검출기를 이용하여 (+)-HCA락톤의 최대흡수파장인 210nm에서 검출하여 정량한다.
장비 및 재료
[ 실험실 장비 및 소모품 ]
용매용 일회용 실린지
여과용 멤브레인 필터 및 디스크형 멤브레인 필터
부피플라스크(50mL)
HPLC용 유리병
초음파진탕기
   
[ 분석장비 ]
고속액체크로마토그래프
자외부흡광광도검출기
칼럼오븐
Capcellpak C18(4.6mm I.d. × 250mm, octadecyl silica) 또는 이와 동등한 것
    
[ 분석장비의 준비 ]
이동상인 10mM황산용액을 분당 1.0mL씩 흘려 기기를 안정화 시킨다.
표준물질 및
일반시약
[ 표준물질 ]
1. (+)-HCA 락톤 ;
- (+)-allo-Hydroxy Citric Acid lactone
- 분자식 : C6H5O7, 분자량 : 189, CAS No. : 27750-13-6
    
    
[ 일반시약 ]
1. 황산용액(Sulfuric acid, Extra grade)
2. 증류수(Distiled water)
방법
[ 시약 제조 ]
1. 10mM황산용액
- 1M 황산용액(증류수 약 800mL을 넣고 황산 15mL을 천천히 가한 후 증류수를 넣어 1000mL에 맞춘다.)을 100배 희석하거나 증류수 약800mL에 황산용액 0.15mL을 넣은 후 증류수를 넣어 1000mL에 맞춘다.
[ 표준용액 제조 ]
(단, 시험용액 중 분석하고자 하는 농도가 검량선 내에 포함될 수 있도록 표준용액의 농도를 적절히 조절하여 사용한다.)
1. (+)-HCA락톤 표준물질 300mg을 정밀히 측정한다.
2. 정밀히 측정한 표준물질을 50mL 부피플라스크에 취한다.
3. 이동상인 10mM 황산용액 약 30mL을 가한다.
4. 30분간 초음파 진탕한다.
5. 이동상을 넣어 표선까지 맞춘다.
6. [4]용액을 이동상으로 희석하여 (+)-HCA락톤으로서 3.0, 1.5, 0.75mg/mL로 하여 농도별 검량선을 작성한다.

[ 시험용액 제조 ]
1. 시료 약 1g을 정밀히 측정한다.
2. 정밀히 측정한 시료를 50mL 부피플라스크에 취한다.
3. 이동상 30mL을 넣고 30분간 초음파 진탕한다.
4. 이동상을 넣어 표선까지 맞춘다.
5. 이 액을 여과지(여과가 잘 되지 않을 경우 뷰흐너깔대기(Buchner funnel)와 감압펌프를 이용하여 여과한다.)로 여과시키고 0.45μm 멤브레인 필터로 여과하여 시험용액으로 한다.
결과분석 및
계산
[ 기기분석 ]
다음 표 1의 조건으로 사용하되 적용되는 기기에 따라 수정이 필요할 수 있다.
표 1. 고속액체크로마토그래프 조건(예)
   
결과 분석(예)
그림 1. 표준물질 크로마토그램 및 스펙트럼
     
[ 계산 ]
- (+)-HCA락톤의 함량(mg/g) = A x (B/C) x D / 100 / 1000
A : 시험용액 중의 바릴티로신의 농도 (μg/mL)
B : 시험용액 전량 (mL)
C : 시료 채취량(mg)
참고문헌 1. G.K. Jayaprakasha, K.K. Sakariah, Determination of organic acids in Garcinia cambogia(Desr.) by high-performance liquid chromatography., Journal of Chromatography A, 806() p337~339, 1998
2. G.K. Jayaprakasha, K.K. Sakariah, Determination of organic acids in leaves and rinds of Garcinia(Desr.) by LC., Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 28() p379~384, 2002
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