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기능/지표 성분기능/지표 성분 입니다

기능/지표 성분 분석법

기능/지표 성분 분석법 상세페이지
구분 지방산 및 지질류 성분명 β-시토시테롤
개요 본 시험법은 시료를 헥산으로 녹여 추출한 것을 (5% Phenyl)-methylpolysiloxane으로 충진된 칼럼을 통하여 β-시토스테롤을 분리하는 방법으로 수소염이온화검출기(FID)를 이용하여 정량한다.
장비 및 재료
[ 실험실 장비 및 소모품 ]
부피플라스크(100mL, 25mL)
HPLC용 유리병
용매용 일회용 실린지
여과용 멤브레인 필터 및 디스크형 멤브레인 필터
   
[ 분석장비 ]
기체크로마토그래피
수소염이온화검출기(FID)
Ultra 2(0.2mm i.d. × 50m, 0.33μm, (5% Phenyl)-methylpolysiloxane) 또는 이와 동등한 것
 
[ 분석장비의 준비 ]
질소가스를 분당 0.9mL로 충분한 시간동안 흘려서 기기를 안정화 시킨다.
표준물질 및
일반시약
[ 표준물질 ]
1. β-시토스테롤(β-sitosterol) ;
- α-Dihydrofucosterol; 22,23-Dihydrostigmasterol;24β-Ethylcholesterol; 5-Stigmasten-3β-ol
- 분자식 : C29H50O, 분자량 : 414.707, CAS No. : 19044-06-5
 
 
[ 일반시약 ]
1. n-헥산(n-Hexane, HPLC grade)
방법
[ 표준용액 제조 ]
1. β-시토스테롤 표준물질 25mg을 정밀히 측정한다.
2. 정밀히 측정한 표준물질을 25mL 부피플라스크에 넣는다.
3. n-헥산 약 15mL을 가하여 녹인다.
4. n-헥산을 넣어 표선까지 맞춘다.
5. [4]의 용액 헥산으로 희석하여 0.45μm 멤브레인 필터를 이용하여 여과한 것을 표준용액으로 사용한다.
    
[ 시험용액 제조 ]
1. 시료 약 250mg 정밀히 측정한다.
2. 정밀히 측정한 시료를 100mL 부피플라스크에 넣는다.
3. 여기에 n-헥산를 40mL을 가해 충분히 용해시킨다.
4. n-헥산을 넣어 표선까지 맞춘다.
5. [4]의 용액을 0.45μm 멤브레인필터를 이용하여 여과한 것을 시험용액으로 사용한다.
결과분석 및
계산
[ 기기분석 ]
다음 표 1의 조건으로 사용하되 적용되는 기기에 따라 수정이 필요할 수 있다.
표 1. 고속액체크로마토그래프 조건(예)
        
결과 분석(예)
그림 1. 표준물질 크로마토그램 및 스펙트럼
    
[ 계산 ]
- β-시토스테롤의 함량(mg/g) = S × (A/B) × C / 100 /1000
S : β-시토스테롤의 농도(ug/mL)
A : 시험용액 전량(mL)
B : 시료 채취량(g)
C : 표준품 순도(%)
참고문헌 1. Saoussem Harrabi, Annik St-Amand, Faouzi Sakouhi, Khaled Sebei, Habib Kallel, Paul M. Mayer, Sadok Boukhchina, Phytostanols and phytosterols distributions in corn kernel., Food Chemistry, 111() p115-120, 2008
2. Liu WH, ding B, Ruanc XM, Xuc HT, Yang J, Liu SM, Analysis of free and conjugated phytosterols in tobacco by an improved method using gas chromatography-flame ionization detection, J. Chromatogr. A., 1163(1-2) p304-311, 2007
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