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기능/지표 성분기능/지표 성분 입니다

기능/지표 성분 분석법

기능/지표 성분 분석법 상세페이지
구분 폴리페놀류 성분명 ρ-쿠마릭산
개요 본 시험법은 시료 중 ρ-쿠마린산 70% 에탄올 용액으로 초음파추출하고 옥타데실 실릴화한 칼럼을 통하여 ρ-쿠마린산을 분리하는 방법으로 자외부흡광광도검출기를 이용하여 ρ-쿠마린산의 최대 흡수파장인 330nm에서 검출하여 정량한다.
 
장비 및 재료
[ 실험실 장비 및 소모품 ]
용매용 일회용 실린지
여과용 멤브레인 필터 및 디스크형 멤브레인 필터
HPLC용 유리병
부피플라스크(100mL, 10mL)
   
[ 분석장비 ]
고속액체크로마토그래프
자외부흡광광도검출기
칼럼오븐
XTerra RP18(4.6mm i.d. × 250mm, 5μm, Octadecyl silica) 또는 이와 동등한 것
  
[ 분석장비의 준비 ]
이동상은 0.1%인산용액과 아세토니트릴을 86 : 14의 비율로 분당 1mL씩 충분한 시간동안 흘려 기기를 안정화 시킨다.
표준물질 및
일반시약
[ 표준물질 ]
1. ρ-쿠마린산 (ρ-coumaric acid) ;
- 4-hydroxycinnamic acid
- 분자식 : C9H8O3, 분자량 : 164.15, CAS No. : 7400-08-0

        
[ 일반시약 ]
1. 에탄올(Ethanol, HPLC grade)
2. 아세토니트릴(Acetonitrile, HPLC grade)
3. 증류수(Distiled water)
4. 인산(Phosphoric acid, Extra grade)
방법
[ 표준용액 제조 ]
1. ρ-쿠마린산 표준물질 10mg을 정밀히 측정한다.
2. 정밀히 측정한 표준물질을 10mL 부피플라스크에 넣는다.
3. 70% 에탄올를 넣어 표선까지 맞춘다.
4. [3]의 용액을 70% 에탄올로 적절히 희석하여 각각의 표준용액으로 사용한다.
     
[ 시험용액 제조 ]
1. 시료 약 2.5g을 정밀히 측정한다.
2. 정밀히 측정한 시료를 50mL 부피플라스크에 넣는다.
3. 여기에 70% 에탄올 약 40mL을 넣고 조심스럽게 흔든다.
4. 30분동안 초음파진탕기로 용해시킨다.
5. 70% 에탄올을 넣어 표선까지 맞춘다.
6. 0.45μm 멤브레인 필터로 여과한다.
결과분석 및
계산
[ 기기분석 ]
다음 표 1, 표 2의 조건으로 사용하되 적용되는 기기에 따라 수정이 필요할 수 있다.
표 1. 고속액체크로마토그래프 조건(예)
     
표 2. 이동상    조건
         
결과 분석(예)
그림 1. 표준물질 크로마토그램 및 스펙트럼
 
          
[ 계산 ]
- ρ-쿠마린산 함량(mg/g) = A × (B/C) × D / 100 / 1000
A : 시험용액 중 ρ-쿠마린산의 농도(ug/mL)
B : 시험용액 전량(mL)
C : 시료 채취량(g)
D : 표준품 순도(%)
참고문헌 1. Monika S, Samo A, Andrej SM, Effect of b-cyclodextrin on antioxidant activity of coumaric acids, Food Chemistry, 110(3) p636-642, 2008
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