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기능/지표 성분기능/지표 성분 입니다
기능/지표 성분 분석법
구분 | 페놀류 | 성분명 | 다이드제인 및 제니스테인 확인 |
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개요 | 본 시험법은 메탄올로 시료를 추출하고, 옥타데실실릴화한 칼럼을 통하여 다이드제인과 제니스테인을 분석하는 방법으로, 다이드제인과 제니스테인의 흡수파장인 260 nm에서 정량한다. | ||
장비 및 재료 | [ 실험실 장비 및 소모품 ] 삼각플라스크(250 mL) 항온수조 원심분리기 용매용 일회용 실린지 여과용 멤브레인 필터(0.45 μm) 액체크로마토그래프용 유리병 부피플라스크(50 mL) 와동(Vortex) 믹서 [ 분석장비 ] 고속액체크로마토그래프 자외부흡광광도검출기 칼럼오븐 옥타데실실릴화한한 칼럼(안지름 4.6 mm, 길이 250 mm, 충진재 octadecyl silica) 또는 이와 동등한 것 [ 분석장비의 준비 ] 이동상은 2% 초산용액과 2% 초산을 함유한 메탄올을 이용하여 용매를 분당 1.0 mL를 충분한 시간동안 흘려 안정화 시킨다. |
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표준물질 및 일반시약 |
[ 표준물질 ] 1. 다이드제인(Daidzein) 분자식 : C15H10O4, 분자량 : 254.24, CAS No. : 486-66-8 ![]() 2. 제니스테인(Genistein)
분자식 : C15H10O5, 분자량 : 270.24, CAS No. : 446-72-0 ![]() [ 일반시약 ] 1. 메탄올(Methanol) 2. 초산(Acetic acid) 3. 증류수(Distilled water) 4. 수산화나트륨(Sodium hydroxide) |
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방법 | [ 표준용액의 조제 ] 1. 표준물질 각 20 mg을 정밀하게 취한다. 2. 위의 표준물질을 50 mL 부피플라스크에 넣는다. 3. 메탄올을 표선까지 맞춘다(20 mg/50 mL → 400 ppm). [ 시험용액의 조제 ] 1. 시료 10 g을 정밀히 취한다. 2. 위의 시료를 250 mL 삼각플라스크에 넣는다. 3. 여기에 80% 메탄올 40 mL를 넣은 후 호일을 씌운다. 4. 65℃ 항온수조에서 2시간 추출한다. 5. 냉각시킨 후 2 M 수산화나트륨용액 3 mL를 넣는다. 6. 이를 상온에서 10분간 회전 교반한 후 빙초산 1 mL를 넣는다. 7. 80% 메탄올을 사용하여 50 mL로 하여 하고 혼합한다. 8. 여액 5 mL에 증류수 4 mL를 넣고 메탄올을 사용하여 10 mL로 한다. 9. 원심분리(5,000 rpm, 5분)한 상징액을 0.45 μm 멤브레인 필터로 여과한다. |
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결과분석 및 계산 |
[ 표준용액의 조제 ] 1. 표준물질 각 20 mg을 정밀하게 취한다. 2. 위의 표준물질을 50 mL 부피플라스크에 넣는다. 3. 메탄올을 표선까지 맞춘다(20 mg/50 mL → 400 ppm). [ 시험용액의 조제 ] 1. 시료 10 g을 정밀히 취한다. 2. 위의 시료를 250 mL 삼각플라스크에 넣는다. 3. 여기에 80% 메탄올 40 mL를 넣은 후 호일을 씌운다. 4. 65℃ 항온수조에서 2시간 추출한다. 5. 냉각시킨 후 2 M 수산화나트륨용액 3 mL를 넣는다. 6. 이를 상온에서 10분간 회전 교반한 후 빙초산 1 mL를 넣는다. 7. 80% 메탄올을 사용하여 50 mL로 하여 하고 혼합한다. 8. 여액 5 mL에 증류수 4 mL를 넣고 메탄올을 사용하여 10 mL로 한다. 9. 원심분리(5,000 rpm, 5분)한 상징액을 0.45 μm 멤브레인 필터로 여과한다. |