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기능/지표 성분기능/지표 성분 입니다

기능/지표 성분 분석법

기능/지표 성분 분석법 상세페이지
구분 페놀류 성분명 다이드제인 및 제니스테인 확인
개요 본 시험법은 메탄올로 시료를 추출하고, 옥타데실실릴화한 칼럼을 통하여 다이드제인과 제니스테인을 분석하는 방법으로, 다이드제인과 제니스테인의 흡수파장인 260 nm에서 정량한다.
장비 및 재료 [ 실험실 장비 및 소모품 ]
삼각플라스크(250 mL)
항온수조
원심분리기
용매용 일회용 실린지
여과용 멤브레인 필터(0.45 μm)
액체크로마토그래프용 유리병
부피플라스크(50 mL)
와동(Vortex) 믹서
 
[ 분석장비 ]
고속액체크로마토그래프
자외부흡광광도검출기
칼럼오븐
옥타데실실릴화한한 칼럼(안지름 4.6 mm, 길이 250 mm, 충진재 octadecyl silica) 또는 이와 동등한 것
 
[ 분석장비의 준비 ]
이동상은 2% 초산용액과 2% 초산을 함유한 메탄올을 이용하여 용매를 분당 1.0 mL를 충분한 시간동안 흘려 안정화 시킨다.
표준물질 및
일반시약
[ 표준물질 ]
1. 다이드제인(Daidzein)
    분자식 : C15H10O4, 분자량 : 254.24, CAS No. : 486-66-8
   
2. 제니스테인(Genistein)
    분자식 : C15H10O5, 분자량 : 270.24, CAS No. : 446-72-0
     
[ 일반시약 ]
1. 메탄올(Methanol)
2. 초산(Acetic acid)
3. 증류수(Distilled water)
4. 수산화나트륨(Sodium hydroxide)
방법 [ 표준용액의 조제 ]
1. 표준물질 각 20 mg을 정밀하게 취한다.
2. 위의 표준물질을 50 mL 부피플라스크에 넣는다.
3. 메탄올을 표선까지 맞춘다(20 mg/50 mL → 400 ppm).
 
[ 시험용액의 조제 ]
1. 시료 10 g을 정밀히 취한다.
2. 위의 시료를 250 mL 삼각플라스크에 넣는다.
3. 여기에 80% 메탄올 40 mL를 넣은 후 호일을 씌운다.
4. 65℃ 항온수조에서 2시간 추출한다.
5. 냉각시킨 후 2 M 수산화나트륨용액 3 mL를 넣는다.
6. 이를 상온에서 10분간 회전 교반한 후 빙초산 1 mL를 넣는다.
7. 80% 메탄올을 사용하여 50 mL로 하여 하고 혼합한다.
8. 여액 5 mL에 증류수 4 mL를 넣고 메탄올을 사용하여 10 mL로 한다.
9. 원심분리(5,000 rpm, 5분)한 상징액을 0.45 μm 멤브레인 필터로 여과한다.
결과분석 및
계산
[ 표준용액의 조제 ]
1. 표준물질 각 20 mg을 정밀하게 취한다.
2. 위의 표준물질을 50 mL 부피플라스크에 넣는다.
3. 메탄올을 표선까지 맞춘다(20 mg/50 mL → 400 ppm).
 
[ 시험용액의 조제 ]
1. 시료 10 g을 정밀히 취한다.
2. 위의 시료를 250 mL 삼각플라스크에 넣는다.
3. 여기에 80% 메탄올 40 mL를 넣은 후 호일을 씌운다.
4. 65℃ 항온수조에서 2시간 추출한다.
5. 냉각시킨 후 2 M 수산화나트륨용액 3 mL를 넣는다.
6. 이를 상온에서 10분간 회전 교반한 후 빙초산 1 mL를 넣는다.
7. 80% 메탄올을 사용하여 50 mL로 하여 하고 혼합한다.
8. 여액 5 mL에 증류수 4 mL를 넣고 메탄올을 사용하여 10 mL로 한다.
9. 원심분리(5,000 rpm, 5분)한 상징액을 0.45 μm 멤브레인 필터로 여과한다.
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