국민의 더 안전하고 건강한 삶을 위한
건강기능식품 플랫폼

  • 통합검색
  • 인정현황
  • 내게맞는실험법
  • 기능지표성분분석법
  • top

기능/지표 성분기능/지표 성분 입니다

기능/지표 성분 분석법

기능/지표 성분 분석법 상세페이지
구분 터핀류 성분명 총 페오포르바이드(제1법)
개요 본 시험법은 시료로부터 인산완충용액 및 아세톤 등을 이용하여 충분히 페오포르바이드를 추출하여 비색법으로 분석하는 방법으로, 최대 흡수파장인 667 nm에서 흡광도를 측정함으로써 정량한다.
장비 및 재료 [ 실험실 장비 및 소모품 ]
분액여두
원심분리관
원심분리기
항온수조
마쇄기(homogenizer)
 
[ 분석장비 ]
분광광도계
 
[ 분석장비의 준비 ]
분석 전 분광광도계를 충분히 안정화시킨다.
표준물질 및
일반시약
[ 일반시약 ]
1. 아세톤(Acetone)
2. 에틸에테르(Ethyl ether)
3. 염산(Hydrochloric acid)
4. 황산나트륨(Sodium sulfate)
 
[ 시액의 조제 ]
1. 1/15 M 인산완충용액
    1/15 M potassium diphosphate(KH2PO4, M.W. 130.90)를 1/15 M dipotassium phosphate(K2HPO4, M.W. 174.18)에 넣어 pH 7.5로 맞춘다.
방법 [ 시험용액의 조제 ]
1. 시료 100 mg(클로렐라 건조물로서)을 정밀히 달아 차가운 1/15 M 인산 완충용액(pH 8.0) : 아세톤 혼합(7 : 3) 10 mL를 가하고 37℃에서 3시간 항온시킨다.
2. 10% 염산으로 약산성화하고 유발에 넣어 약 0.5 g 해사 및 85%(v/v) 아세톤 20 mL를 가하여 마쇄한다.
3. 상등액을 원심분리관으로 옮기고, 잔사에 아세톤 10 mL를 첨가하여 위의 과정을 2회 반복한다.
4. 상등액을 모두 합하여 원심분리(3000 rpm, 5분)한 후, 에틸에테르 30 mL를 넣은 분액여두로 옮긴다.
5. 에틸에테르와 아세톤 혼합액에 5% 황산나트륨용액 50 mL를 가하여 약하게 흔든 후, 황산나트륨층을 버린다(3회 반복).
6. 무수황산나트륨을 가하여 탈수한 후 에틸에테르층을 취한 다음, 에틸에테르를 가해 전량을 50 mL로 하여 이를 색소원액으로 한다.
7. 색소원액 중 20 mL를 취하여 17% 염산 20 mL를 넣고 흔들어 추출한 후 염산층을 취한다.
8. 이후 17% 염산 10 mL를 넣고 한 번 더 흔들어 추출한 후 염산층을 모은다.
9. 모은 염산층에 포화황산나트륨 용액 150 mL와 에틸에테르 20 mL를 넣고 흔들어 추출한다.
10. 에틸에테르층을 분취하고 전량을 20 mL로 한 것을 시험용액으로 한다.
결과분석 및
계산
[ 시험용액의 조제 ]
1. 시료 100 mg(클로렐라 건조물로서)을 정밀히 달아 차가운 1/15 M 인산 완충용액(pH 8.0) : 아세톤 혼합(7 : 3) 10 mL를 가하고 37℃에서 3시간 항온시킨다.
2. 10% 염산으로 약산성화하고 유발에 넣어 약 0.5 g 해사 및 85%(v/v) 아세톤 20 mL를 가하여 마쇄한다.
3. 상등액을 원심분리관으로 옮기고, 잔사에 아세톤 10 mL를 첨가하여 위의 과정을 2회 반복한다.
4. 상등액을 모두 합하여 원심분리(3000 rpm, 5분)한 후, 에틸에테르 30 mL를 넣은 분액여두로 옮긴다.
5. 에틸에테르와 아세톤 혼합액에 5% 황산나트륨용액 50 mL를 가하여 약하게 흔든 후, 황산나트륨층을 버린다(3회 반복).
6. 무수황산나트륨을 가하여 탈수한 후 에틸에테르층을 취한 다음, 에틸에테르를 가해 전량을 50 mL로 하여 이를 색소원액으로 한다.
7. 색소원액 중 20 mL를 취하여 17% 염산 20 mL를 넣고 흔들어 추출한 후 염산층을 취한다.
8. 이후 17% 염산 10 mL를 넣고 한 번 더 흔들어 추출한 후 염산층을 모은다.
9. 모은 염산층에 포화황산나트륨 용액 150 mL와 에틸에테르 20 mL를 넣고 흔들어 추출한다.
10. 에틸에테르층을 분취하고 전량을 20 mL로 한 것을 시험용액으로 한다.
목록보기