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기능/지표 성분기능/지표 성분 입니다

기능/지표 성분 분석법

기능/지표 성분 분석법 상세페이지
구분 발효미생물류 성분명 비피더스균(Bifidobacterium)
개요 본 시험법은 시료에 함유된 유산균을 BL 배지를 이용하여 배양하는 방법으로 배양 후 집락계산기로 정량한다.
장비 및 재료 [ 실험실 장비 및 소모품 ]
고압멸균기(Autoclave)
고압멸균가능병
무균대(Clean bench)
도말봉(Spreader, 스프레더)
마개 있는 시험관
소독용 알콜 램프
항온배양기(Incubator)
표준물질 및
일반시약
[ 일반시약 ]
1. 에탄올(Ethanol)
 
[ 시액 및 배지의 조제 ]
1. 펩톤식염완충액(Buffered Peptone Water)
1.1. Peptone 10 g, Sodium Chloride 5 g, Disodium Phosphate 3.5 g, Mono-potassium Phosphate 1.5 g을 1 L 부피플라스크에 넣는다.
1.2. 증류수에 가하여 1,000 mL로 하고 pH 7.2±0.2로 조정한다.
1.3. 121℃에서15분간 고압 멸균한다.
2. BL 한천배지(BL Agar)
2.1. Beef Extract 3 g, Liver Extract 5 g, Yeast Extract 5 g, Proteose Peptone 10 g, Tryptone 5 g, Soypeptone 3 g, Soluble Starch 0.5 g, Glucose 10 g, Dipotassium Phosphate 1 g, Monopotassium Phosphate 1g, Magnesium Sulfate 0.2g, Sodium Chloride 0.01g, Manganese Sulfate 0.00674 g, L-Cysteine‧HCl‧H2O 0.5 g, Ferrous Sulfate  0.01 g, Polysorbate 80(Tween 80) 1 g, Agar 15 g을 1 L 부피플라스크에 넣는다. 시판용 BL 한천배지 사용도 무관하다.
2.2. 증류수를 이용하여 1,000 mL로 하고, pH 7.2로 조정한다.
2.3. 121℃에서 15분간 멸균하여, 50℃로 냉각시킨다.
2.4. 소, 말, 양 또는 사람의 탈섬유소 혈액을 5% 되도록 첨가한다.
3. BS한천배지(유산균과 비피더스균의 혼합제품에 적용)
3.1. BL agar 1 L에 Sodium Propionate 15 g, Praomomycin Sulfate 50 mg, Neomycin 100 mg, Lithium Chloride 3 g을 첨가하여 조제한다.
3.2. 121℃에서 15분간 멸균한다.
방법 [ 시험용액의 조제 ]
1. 액상시료
1.1. 채취된 시료를 강하게 진탕하여 혼합한 것을 시험용액으로 한다.
2. 반유동상시료
2.1. 채취된 시료를 멸균유리봉과 멸균스파테르 등으로 잘 혼합한다.
2.2. 그 일정량(10~25 mL)을 멸균용기에 취해 9배 양의 멸균생리식염수와 혼합한 것을 시험용액으로 한다.
3. 고체시료
3.1. 채취된 시료의 일정량(10~25 g)을 멸균된 가위와 칼 등으로 잘게 자른다.
3.2. 멸균생리식염수를 가해 균질기를 이용해서 가능한 한 저온으로 균질화한다.
3.3. 여기에 멸균생리식염수를 가해서 일정량(100~250 mL)으로 한 것을 시험용액으로 한다.
4. 분말상시료
4.1. 시료를 멸균유리봉과 멸균스파테르 등으로 잘 혼합한다.
4.2. 그 일정량(10 g)을 멸균용기에 취해 9배 양의 멸균생리식염수와 혼합한 것을 시험용액으로 한다.
5. 캡슐제품류
5.1. 캡슐을 포함하여 시료의 일정량(10~25 g)을 취한다.
5.2. 9배 양의 멸균생리식염수를 가해 균질기와 스토마커 등을 이용하여 균질화한 것을 시험용액으로 한다.
6. 시험용액 조제 시 주의사항
6.1. 위와 같이 조제된 시험원액에 대해서는 멸균생리식염수 9 mL에 시험원액 1 mL를 취하여 10배 희석액으로 만든다.
6.2. 필요에 따라 102배, 103배, 104배… 희석액을 만들어 사용한다.
6.3. 시험용액의 조제 시 시료를 용기 포장한 대로 채취할 때에는 그 외부를 물로 씻고 자연건조시킨 다음 마개 및 그 하부 5~10 cm의 부근까지 70% 알콜탈지면으로 닦고, 화염멸균한 후 냉각하고 멸균한 기구로 개봉, 또는 개관하여 2차 오염을 방지하여야 한다. 지방분이 많은 시료의 경우는 Tween 80과 같은 세균에 독성이 없는 계면활성제를 첨가하는 것이 좋다.
7. 냉동제품
7.1. 냉동상태의 시료를 포장된 상태 그대로 40℃이하에서 될 수 있는 대로 단시간에 녹여 용기, 포장의 표면을 70% 알코올 솜으로 잘 닦은 후 상기 [캡슐제품류] 1.1.~1.5.의 방법으로 시험용액을 조제한다.
결과분석 및
계산
[ 시험용액의 조제 ]
1. 액상시료
1.1. 채취된 시료를 강하게 진탕하여 혼합한 것을 시험용액으로 한다.
2. 반유동상시료
2.1. 채취된 시료를 멸균유리봉과 멸균스파테르 등으로 잘 혼합한다.
2.2. 그 일정량(10~25 mL)을 멸균용기에 취해 9배 양의 멸균생리식염수와 혼합한 것을 시험용액으로 한다.
3. 고체시료
3.1. 채취된 시료의 일정량(10~25 g)을 멸균된 가위와 칼 등으로 잘게 자른다.
3.2. 멸균생리식염수를 가해 균질기를 이용해서 가능한 한 저온으로 균질화한다.
3.3. 여기에 멸균생리식염수를 가해서 일정량(100~250 mL)으로 한 것을 시험용액으로 한다.
4. 분말상시료
4.1. 시료를 멸균유리봉과 멸균스파테르 등으로 잘 혼합한다.
4.2. 그 일정량(10 g)을 멸균용기에 취해 9배 양의 멸균생리식염수와 혼합한 것을 시험용액으로 한다.
5. 캡슐제품류
5.1. 캡슐을 포함하여 시료의 일정량(10~25 g)을 취한다.
5.2. 9배 양의 멸균생리식염수를 가해 균질기와 스토마커 등을 이용하여 균질화한 것을 시험용액으로 한다.
6. 시험용액 조제 시 주의사항
6.1. 위와 같이 조제된 시험원액에 대해서는 멸균생리식염수 9 mL에 시험원액 1 mL를 취하여 10배 희석액으로 만든다.
6.2. 필요에 따라 102배, 103배, 104배… 희석액을 만들어 사용한다.
6.3. 시험용액의 조제 시 시료를 용기 포장한 대로 채취할 때에는 그 외부를 물로 씻고 자연건조시킨 다음 마개 및 그 하부 5~10 cm의 부근까지 70% 알콜탈지면으로 닦고, 화염멸균한 후 냉각하고 멸균한 기구로 개봉, 또는 개관하여 2차 오염을 방지하여야 한다. 지방분이 많은 시료의 경우는 Tween 80과 같은 세균에 독성이 없는 계면활성제를 첨가하는 것이 좋다.
7. 냉동제품
7.1. 냉동상태의 시료를 포장된 상태 그대로 40℃이하에서 될 수 있는 대로 단시간에 녹여 용기, 포장의 표면을 70% 알코올 솜으로 잘 닦은 후 상기 [캡슐제품류] 1.1.~1.5.의 방법으로 시험용액을 조제한다.
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